抗病毒活性試驗-國家檢驗檢測中心

抗病毒活性試驗是將病毒分別接種在試樣和對照樣上，在特定的接觸時間后，計數(shù)剩余的感染性病毒數(shù)量(病毒感染滴度)，以抗病毒試樣和對照樣試樣中剩余感染性病毒的平均對數(shù)值的差值作為病毒減少值，或以抗病毒試樣和對照樣試樣中剩余感染性病毒數(shù)量的平均值來計算病毒減少率。病毒感染滴度采用噬斑法或TCID50法測定。

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抗病毒活性試驗步驟

1、試樣準(zhǔn)備

所有試樣均置于帶蓋樣品瓶中備用。

如果將培養(yǎng)皿試驗條件下放入培養(yǎng)箱時，能保持濕度穩(wěn)定(通過在每個培養(yǎng)皿上蓋上蓋子)，則可在無菌培養(yǎng)皿中制備試樣。在進(jìn)行試驗之前，無菌地將試樣轉(zhuǎn)移至無菌瓶中。

2、試樣接種病毒

對于吸水性試樣，用微量移液器精準(zhǔn)吸取0.2mL病毒懸液多點接種至樣品瓶中的試樣上，然后用瓶蓋密封樣品瓶。

對于疏水性織物試樣，用微量移液器精準(zhǔn)吸取 0.2mL病毒懸液多點接種至50mmX50 mm的試樣上，再用另一塊50mmX50mm的樣片覆蓋，使試樣抗病毒處理面與病毒懸液充分接觸。對于疏水性纖維或紗線試樣，用微量移液器精準(zhǔn)吸取0.2mL病毒懸液多點接種至50mmX50mm的試樣上，再用50mmX50mm的不影響病毒活性的塑料薄膜覆蓋，使試樣與病毒懸液充分接觸。

3、接觸時間

將樣品瓶放入培養(yǎng)箱，在25℃條件下培養(yǎng)2h。經(jīng)相關(guān)方協(xié)商確定后可調(diào)整接觸時間，但不超過24h，并在試驗報告中注明。

4、接種后立即洗脫病毒

3個對照樣試樣接種病毒后，立即在樣品瓶中加入20mL的SCDLP液體培養(yǎng)基，然后將樣品瓶蓋上瓶蓋，用旋渦混合器振蕩5次，每次5s，將病毒從試樣中洗脫下來。

注：該病毒懸液將作為對照試樣的初始洗脫病毒懸液。

5、接觸時間后洗脫病毒

3個對照樣試樣和3個抗病毒試樣接觸2h后，在樣品瓶中加入20ml的SCDIP液體培養(yǎng)基，然后蓋上瓶蓋，用旋渦混合器振蕩5次，每次5s，將病毒從試樣中洗脫下來。

注：這些病毒懸液是與對照樣試樣和抗病毒試樣經(jīng)接觸時間后的初始洗脫病毒懸液。

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